1、配料：配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱取各種藥品→加足所需水量。

 

　　2、溶解：

　　淀粉溶解：少量冷水調成糊狀

　　加熱溶解，特別是加有瓊脂的培養基，一定要煮沸，瓊脂的熔解溫度95～97℃，且需要邊

　　加熱邊攪拌以防止燒焦。

 

　　3、調pH：用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養基調節到所要求的值。

 

　　4、過濾：濾紙或棉花進行過濾。

 

　　5、分裝：一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。

 

　　6、包扎：分裝好后，塞上棉塞，在用牛皮紙將棉塞包裹好，防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。

 

　　7、滅菌：按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高，營養成分會被破壞，培養基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。

 

　　8、擺斜面：滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放，使其凝固成為一個斜面，約占試管長度的1/2。

 

　　9、貯存：培養基在30℃下放置一天，無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。

 

　　Gibco液體培養基的操作步驟：

　　1、準確稱量試劑：根據不同的菌類和用途，選擇適宜的培養基，培養基所需試劑必須純凈。

 

　　2、校正ph值：將稱量好的培養基各種成分放入容器內，標記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度。

 

　　3、過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養基倒入其中過濾至透明。

 

　　4、分裝：將過濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶內，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準備。

 

　　5、培養基的，常用高壓蒸汽法。一般微生物的營養細胞在水中煮沸后即被殺死，但細菌的芽胞有較強的抗熱性，須經高壓蒸汽才能達到的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽比干熱法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。