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細胞培養中常用溶液配制

發布時間: 2017-02-09  點擊次數: 3319次

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PBS

NaCl 8 g
KCl 0.2 g
KH2PO4 0.2 g 
Na2HPO4·12H2O 3.634g
加dH2O至900ml,調pH至7.4,補水至1L,分裝到5個藍蓋瓶,滅菌。

TP+EDTA混合液

稱取TP 0.25g,EDTA 0.02g,溶于200ml PBS中,過濾除菌。

DMEM與RPMI 1640
前者稱取NaHCO3 3.7g,后者稱取2.0g。
調pH至7.2~7.4。

谷氨酰胺的配制
稱取Gln 2.922g,溶于三蒸水,加至100ml,即配成200 mM的儲液。充分攪拌溶解,過濾除菌,分裝到2ml EP管中,-20℃保存。使用時可向100ml培養液中加入1ml Gln儲液。
由于谷氨酰胺在溶液中很不穩定,4℃下放置1周可分解50%,加有谷氨酰胺的培養液在4℃冰箱中儲存2周以上時,應重新加入原來的谷氨酰胺。

G418儲液(0.1 mg / uL)
100ml 培養基中加入儲液400uL,則篩選濃度為400 ug/ml。
100ml培養基中加入儲液200 uL,則維持濃度為200 ug/ml。

 

LB液體培養基
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g 
NaCl 10g
dH2O 1L
用5M的NaOH約0.2 ml調pH至7.0。滅菌20min。
LB固體培養基,另加瓊脂12~15g。 
LB中氨芐的添加
稱取5g氨芐,加水定容至50ml,充分溶解,得到的儲液濃度為100mg/ml。過濾除菌,分裝到EP管中,-20℃保存。
欲使其工作濃度為100ug/ml,則需稀釋1000倍。
即加1ml到1000ml培養基中?;蚣?00ul到100ml培養基中。

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